Guanidine thiocyanate সমাধান তৈরিতে সাধারণ প্রশ্ন ও উত্তর

গুয়ানিডিন থায়োসায়ানেট একটি শক্তিশালী প্রোটিন ডিনাচুরেন্ট। এটি শুধুমাত্র প্রোটিনগুলিকে দ্রুত দ্রবীভূত করতে পারে না, কোষের কাঠামোর বিভক্তির দিকে পরিচালিত করতে পারে এবং গৌণ কাঠামোর ধ্বংসের কারণে নিউক্লিক অ্যাসিড থেকে নিউক্লিক অ্যাসিডগুলিকে দ্রুত আলাদা করতে পারে, তবে RNases-এর উপর একটি শক্তিশালী বিকৃতকরণ প্রভাবও রয়েছে। অতএব, গুয়ানিডিন থায়োসায়ানেট কোষকে লাইজ করতে, আরএনএকে প্রোটিন থেকে আলাদা করতে এবং আরএনএকে দ্রবণে মুক্ত করতে ডিনাচুরেন্ট হিসেবে ব্যবহার করা যেতে পারে। যাইহোক, গুয়ানিডিন থায়োসায়ানেট দ্রবণ তৈরি ও ব্যবহারে প্রায়শই কিছু সমস্যার সম্মুখীন হতে হয়। এই কাগজ এক এক করে এই সমস্যার উত্তর দেবে।

গুয়ানিডিন থায়োসায়ানেট দ্রবণ কি এখনই ব্যবহার এবং প্রস্তুত করা দরকার?

উদাহরণ হিসেবে গুয়ানিডিন থায়োসায়ানেটের চূড়ান্ত ঘনত্ব ছিল 4 মি: 42 মিমি সোডিয়াম সাইট্রেট, 0.83% এন-লরিল সারকোসিন (সোডিয়াম ডোডেসিল, এন-মিথাইলগ্লাইসিন), 0.2 মিমি β- mercaptoethan থেকে CSB বাফারের প্রস্তুতি; 25 গ্রাম গুয়ানিডিন থায়োসায়ানেট এবং 33 মিলি সিএসবি বাফার দ্রবণ সম্পূর্ণরূপে দ্রবীভূত না হওয়া পর্যন্ত মিশ্রিত করা হয়। বিকৃত দ্রবণটি 65 এ গরম এবং দ্রবীভূত করে প্রস্তুত করা যেতে পারে℃ এবং 4 এ সংরক্ষণ করা হয়℃ স্ট্যান্ডবাইয়ের জন্য।

অতএব, গুয়ানিডিন থায়োসায়ানেট দ্রবণ এখন ব্যবহার এবং প্রস্তুত করতে হবে না, এবং বর্তমানে বাজারে বিভিন্ন ঘনত্বের সমাধান রয়েছে, তবে সংরক্ষণের সময় খুব বেশি দীর্ঘ হওয়া সহজ নয়, অন্যথায় বৃষ্টিপাত হবে, যা হতে হবে। ব্যবহারের আগে সাবধানে পরীক্ষা করা হয়; উপরন্তু, খুব বেশি এক-সময়ের প্রস্তুতি থাকলে, এটি পুনরায় প্যাক করার সুপারিশ করা হয়।

Guanidine thiocyanate সমাধান প্রস্তুতি পরে নির্বীজন প্রয়োজন?

গুয়ানিডিন থিওসায়ানেট দ্রবণকে জীবাণুমুক্ত করার প্রয়োজন হয় না, যা খুব স্থিতিশীল নয়, এবং 0.1% DEPC জল সাধারণত পাইরোলাইসিস দ্রবণ দিয়ে ব্যবহার করা হয়, এবং জল নির্বীজন করা হয়েছে। এছাড়াও, আরএনএ নিষ্কাশনের জন্য সমস্ত রিএজেন্টকে ডিইপিসি জল দিয়ে প্রস্তুত করা দরকার এবং রিএজেন্টটি নতুনভাবে খোলা উচিত এবং একচেটিয়াভাবে আরএনএর জন্য ব্যবহার করা উচিত।

যদিও প্রস্তুত লাইসেটকে জীবাণুমুক্ত করার প্রয়োজন নেই, তবে এটি লক্ষ করা উচিত যে পরীক্ষায় ব্যবহৃত প্লাস্টিক পণ্যগুলি RNase মুক্ত চিহ্নিত করা হয়েছে। যদি সেগুলি ব্যবহারের জন্য খোলা না থাকে তবে সেগুলি সরাসরি ব্যবহার করা যেতে পারে। অন্যদের অবশ্যই চিকিত্সা করতে হবে: 0.1%চূড়ান্ত ঘনত্ব করতে DEPC কে ডাবল ডিস্টিলড পানিতে যুক্ত করুন, এতে প্লাস্টিকের পণ্যগুলি ভিজিয়ে রাখুন, রান্নাঘরটি রাতারাতি বায়ুচলাচল করুন এবং তারপরে অ্যালুমিনিয়াম ফয়েল দিয়ে সিল করুন, কমপক্ষে 30 মিনিটের জন্য উচ্চ তাপমাত্রা এবং উচ্চ চাপ নির্বীজন, শুকনো এবং স্ট্যান্ডবাই।